کلونینگ و بیان بخش های آنتی ژنیک سیتوتوکسین مرتبط با ژن a (caga) هلیکو باکتر پیلوری در باکتری اشرشیاکلی و امکان سنجی تولید igy در زرده تخم مرغ

هلیکوباکتر پیلوری شایع ترین پاتوژن گوارشی است که نیمی از مردم دنیا را آلوده ساخته و مهمترین علت بیماری های معده ای-روده ای از جمله گاستریک مزمن، زخم معده و دوازدهه، سرطان معده و لنفوما است. ژن caga (سیتوتوکسین مرتبط با ژن a) یکی مهمترین شاخص های بیماری زای این باکتری است. در این مطالعه به منظور همانه سازی بخش های آنتی ژنیک ژن caga و بررسی تولید igy در زرده تخم مرغ در ابتدا بر اساس برنامه های بیوانفورماتیکی قطعه حاوی اپی توپ های اصلی ژن caga به طول 996 جفت باز شناسائی شد سپس این قطعه به کمک pcr از ژنوم هلیکوباکتر پیلوری موجود در بیوپسی معده 30 بیمار مبتلا به این باکتری جدا شده و با استفاده از هضم آنزیمی به ناقل pet32a و سپس به داخل میزبان های کلون سازی و بیانی وارد شد. نتایج توالی یابی کلونیگ موفق ژن caga را نشان داد و در نهایت ترکیب پروتئینی بدست آمده توسط روش sds-page و دات بلات تائید شد. در مرحله بعد ترکیب پروتئینی بدست آمده به 3 مرغ از نژاد hy-line تزریق شد. تخم مرغ ها به مدت 10 هفته جمع آوری شدند و igy تولید شده در زرده تخم مرغ آنها با استفاده از روش sds-page بررسی و تائید شد.